試管嬰兒的步驟因患者的具體情況而有一些差異。它可以是簡單的體外受精和胚胎移植，也可能是體外受精加上其他的輔助生殖技術，如顯微授精、輔助孵化、外科方法取精、卵子的體外成熟、卵子/精子/胚胎冷凍、胚胎著床前診斷等。先介紹簡單的體外受精和胚胎移植技術，它是試管嬰兒技術的基礎。

　　試管嬰兒的基本步驟是：讓女性產生數個卵子，將卵子從卵巢內取出，精子從男性取出，在試管嬰兒實驗室里使精子和卵子受精，受精后的卵子體外培養以便選擇好的胚胎用來移植，將胚胎移植到患者的子宮，胚胎移植后的妊娠支持，胚胎移植后的妊娠檢查，妊娠后的胎兒數日檢查及胚胎著床部位的確定等。

　　1．女性患者的卵子產生

　　女性患者的卵子產生在臨床上叫做控制性超排卵處理，需要10～15天的時間。

　　什么是超排卵處理？為何要進行超排卵處理呢？

　　下文從自然排卵談起。婦女的自然排卵周期中一般只有1個（有時也有1個以上）的優勢卵泡發育，這個優勢卵泡內的卵子成熟、排卵，受精后只能形成1個胚胎（單胎）。如果有兩個卵成熟、排卵，受精后就會形成兩個胚胎（異卵雙胞胎）。如果有1個卵成熟、排卵，受精后形成1個胚胎，但這個胚胎在著床前分裂成兩部分，也會形成兩個胚胎（同卵雙胞胎）。

　　由此可見，一般自然排卵也就是1個。而用這1個卵來進行體外受精的話，最多只能生產1個胚胎。在胚胎移植時就沒有選擇的余地。移植1個胚胎的妊娠率是很低的。有時，這個卵可能不被受精或不發育，就沒有機會懷孕。所以需要采用控制性超排卵來增強與改善卵巢功能，以達到不受自然周期的限制，獲得多個健康卵子的目的，這樣在實驗室里可以培養出更多的胚胎，從中選擇高質量的胚胎移植，就能增加懷孕的機會。

　　控制性超排卵一般是先用一種叫GnRHA（促性腺激素釋放激素激動劑，具體是達菲林和達必佳）的激素藥物，它能阻止體內促卵泡激素和促黃體激素的分泌，這樣外源性的激素就更能發揮作用。再用卵泡生長的激素刺激卵巢中的卵泡成長。為了使卵巢內的多個卵泡同時發育，一般患者是在月經期的第2－3天開始用促卵泡激素，這時的卵巢內一般沒有大的卵泡。

　　依據患者對藥物的反應調整藥物使用劑量和使用時間，患者的年齡和對藥物的反應不同，用藥的劑量和用藥時間也不同。待卵泡長到一定程度，卵泡內的卵子長到能夠成熟的大小，再給予促卵子成熟的激素。等卵子基木成熟，但還沒有排卵之前，通過手術方法把它們取出來。

　　對于大多數患者，需持續用藥10天左右，有些可能短到8天，而長者可達15~16天。藥物的種類和劑量取決于病人的具體情況（細節請讀排卵藥物和排卵處理章節）。

　　在一些治療周期中，應用藥物后排卵可能會自動發生。當自動排卵發生時，卵子可能在盆腔中丟失，這個周期為此必須取消。有些患者可能在用藥幾天后，卵巢仍然沒有反應，即無任何卵泡生長．對于這種情況，醫生也會取消這一治療周期。

　　2．卵子誘導成熟（取卵前35～36小時）

　　上述用藥大多數情況下只能使卵子長大，但是還不能獲得成熟卵。為了評價卵泡內的卵子是否具有成熟能力，醫生必須用超聲儀來監測卵泡的大小，并配合檢查血液的雌激素水平。當2或3個以上的卵泡直徑大于1。8～2厘米，雌激素水平與卵泡數量相符時，這時的卵子就具有成熟的能力了。 醫生便可注射人絨毛促性腺激素促使卵泡內卵子成熟。人卵子的成熟時間大約是36-40小時，注射人絨毛促性腺激素后必須在35~36小時內取出。因此，醫生會安排患者的取卵時間。由于取卵手術一般是在上午進行，所以注射人絨毛促性腺激素的時間一般在前兩天的下午到晚上進行。

　　3．取卵（胚胎的第0天）

　　取卵是在注射了人絨毛促性腺激素的35～36小時內進行。過早或過遲取卵都會影響卵的取出率和取出卵的質量。過早可能會使卵子未能完全成熟，有較多的未成熟卵，而過遲有可能使一些大卵泡排卵，因而取不到卵。

　　取卵是一個小手術，可以是在全身麻醉下或是在局部麻巢下進行。經陰道超聲儀引導，將取卵針穿過陰道，直達卵巢吸取卵子后，實驗室人員立即在顯微鏡下將吸到的卵子移到含有胚胎培養液的培養皿中，置于37℃的培養箱中培養。由于陰道內超聲波吸入術是一種小手術，有些醫生為了讓患者節約費用只使用止痛藥而不使用全身麻醉。

　　一般取卵時間在30分鐘之內。患者取卵后只有輕微的疼痛和極少量的出血，休息1~2個小時就可以回家，不會影響日常工作和生活。由于卵泡大小不一，因此取出的卵子的成熟階段并不完全一致。有的可能是未成熟的，而有的可能是過成熟的。剛取出的卵周圍被卵丘細胞所包圍，一般可以通過這些細胞的擴張程度判斷出卵子的成熟情況。但是，要知道它們的準確成熟階段，必須將這些細胞與卵子分開。一般說來，可發現有以下幾種卵子：

　　1）成熟卵 透明帶下的卵周隙內有一個小的細胞，叫做第一極體，它是由卵子釋放的。第一極體的釋放是卵子成熟的指標。

　　2）未成熟卵 有兩種不同時期的未成熟卵。一種是在透明帶下的卵周隙內沒有第一極體，但卵子內有一個明顯的核，叫做生發泡，這種卵叫做生發泡期卵，這是最早期的未成熟卵。另一種是卵子的卵周隙內沒有第一極體，卵子內也沒有一個明顯的核，這是處于生發泡期卵和成熟卵之間的未成熟卵。未成熟卵是不能用于受精的，必須等到它們完全成熟后才能用來受精。

　　3）過成熟卵 卵子成熟后必須受精。從卵子成熟到受精之間的時間一般是5～6個小時。如果在這個時間段內未能受精，卵子將會開始老化，最后死亡。由于卵子取出的時候卵泡大小不一，卵子的成熟階段也就不可能在同一個時期。如果用時間過長，或卵子在受精前的體外時間過長都會使卵子過成熟。雖然過成熟卵能夠被受精，但是由它產生的胚胎質量將會很差，胚胎移植后很難懷孕。

　　4）異常卵 有些卵從體積上看要比正常卵大許多，卵周隙內有兩個第一極體，這樣的卵的染色體是異常的，通常有兩套染色體， 因此是不能用來受精的。有的卵可能在成熟的某一階段細胞內有異常的形態，如空泡、質地變黑等，這些都是卵子質量不好的標志。

　　4．取精（胚胎的第0天）

　　用于體外受精的精子可以是新鮮采集的精液，也可以是冷凍保存的精液或者是從睪丸、附睪內抽取的精子。

　　如果是新鮮精液，采集應與取卵同時進行。實驗室工作人員或護士會告訴病人注意事項和采集方法，并提供無菌的精液采集小杯。精液采集后，需馬上送到實驗室，實驗室工作人員接照實驗室方法處理精液，包括將液化的精液在加入洗滌液后離心，將精漿除去，再用上游法或密度梯度離心法將活動的精子分離出來。

　　如果是睪丸或附睪內抽取精子，丈夫需要做一個小手術來取得精子。如果是冷凍精子或供精（大多數是冷凍精子），精子應該在取卵前儲藏在實驗室，不需男性患者當天去門　　5．授精（胚胎的第0天）

　　授精本身是一個非常簡單的過程。如果要做常規的體外受精，取卵后4~5小時將處理后的精子在計算確定好數量后與卵子放在同一個培養皿中，共同培養14~18小時左右，然后在顯微鏡下觀察受精情況。精子數量必須確定，精子過多或過少都會影響卵子受精的結果。精子過多將導致多精子受精卵的產生，而精子過少將不能使卵子受精。若精子質量太差，就無法做常規的體外受精，如睪丸、附睪內抽取的精子，則必須以顯微注射的方法授精（詳見顯微授精）。

　　6．受精檢查（胚胎的第1天） 受精14－18小時后，必須檢查卵子的受精情況。將那些受精的卵子（這時候應該叫受精卵）挑選出來在胚胎培養液中繼續培養。用來受精的卵子并不一定會全部成功受精，有的可能沒有受精，而有的可能是異常受精。受精卵的判斷有以下幾個標準：

　　1）未受精卵 精子沒有進入卵子，卵子的狀態與受精前完全一樣。這些卵子可能會出現一些過成熟的表現，有時很難從卵子的形態上來判斷。如果重新授精，這些卵子也有受精的可能，但來源于這種卵的受精卵，胚胎的發育不是很好，如果移植這樣的胚胎懷孕的機會是非常小的。

　　2）正常受精卵 一個精子穿入卵子，并將卵子激活，卵子釋放出第二極體。因而卵周隙內可以看到兩個極體，卵子的分裂到此為止。卵子內這時形成兩個核，稱為原核，其中一個來源于卵子（雌原核），而另一個來源于精子（雄原核）。這是正常受精卵，不過這時候應當稱之為胚胎。受精卵內的遺傳物有一半來自卵子，另一半來自精子。準確地講，一個真正的生命就此開始了。

　　3）多精受精卵 如果有兩個或者兩個以上的精子進入卵子，卵子也能夠被激活，并釋放出第二極體，并形成一個來自于卵子的原核， 但是每一個進入卵子的精子也能形成一個來自于精子的原核。因此，這時候的卵子內部有三個或三個以上的核。這種受精卵叫做多精受精卵。胚胎的染色體將來就不是 23對，而是多于23對。大多數情況下多精受精卵不能正常發育和著床。多精受精卵的胚胎必須廢棄，不能用來移植。

　　多精受精卵出現有兩個方面的原因：一個是卵子方面。 在正常情況下，卵子成熟后．它會產生一種多精受精阻止機制，它包括卵子的膜下出現的一些含有酶的顆粒（叫做皮質顆粒）和卵子周圍的透明帶。當第一個精子進入卵子的時候，這些皮質顆粒的膜與卵細胞膜融合．將酶釋放到卵周隙。細胞膜的變化快速地阻止了正在進入的其他精子。與此同時，皮質顆粒釋放的酶將對透明帶的蛋白質起作用，改變透明帶的性質，使其他精子不能繼續進入透明帶，這樣一來就達到了阻止多精受精的目的。如果卵子的成熟有問題或透明帶異常， 都會導致多精受精。這種情況在臨床上較為少見，如果有，可以用顯微受精的方法來避免。另一個是精子方面。正常受精時，一個卵子的周圍不是只有一個精子，而是有數以千計的精子，這樣才能保證有一個精子進入。如果卵子周圍精子過少，卵子就不能被受精，而精子過多，將會導致多精受精。這時候幾個精子同時進入卵子，卵子無法在短時間內阻止它們。多精受精的程度和多精受精的比例與受精時的精子濃度成正比。因此，常規的體外受精時的精子濃度必須計算準確，以減少多精受精。

　　4）孤雌激活卵 孤雌激活卵是指卵子內只有一個來自卵子的原核，而沒有來自精子的原核，也就是說只有一個核。它的出現情況比較復雜。可能是精子沒有進入，卵子被自發激活，這就是純粹的孤雌激活。也可能是精子進入了卵子并將卵子激活，但是精子的核沒有變成原核。這種卵也有分裂的情況，但胚胎不能著床或發育成胎兒，因此也必須廢棄。

　　受精檢查必須在受精后20小時內進行。20小時后，由子兩個原核的核膜融合，并將開始胚胎的分裂．就無法判定是否受精。

　　一般說來，體外受精的正常受精率在70％～90％之間。有的患者的卵子可能全部受精，而有些患者的卵子可能沒有一個受精。

　　7．胚胎體外培養（胚胎的第1～6天）

　　正常受精卵必須放到提前準備好了的胚胎培養液內培養。培養的當天（第1天），胚胎應該分裂l次，成為2細胞； 第2天再分裂l次成為4細胞；到第3天時，好的胚胎應該是分裂了3次的8細胞，有時也會出現4～7細胞或大于8細胞的胚胎。 如果這時候不移植胚胎，胚胎必須移到新鮮配制的胚胎培養液里繼續培養約48～72小時。這時候，好的胚胎應該分裂了6次以上并形成囊胚。有的囊胚開始孵化或已完全從透明帶中孵化出來，特別是第6天的胚胎。 而不好的胚胎可能停留在某一階段，只有囊胚可以用來移植，多余的囊胚可以冷凍保存，其他時期的胚胎可以認為已停止發育，一般情況下丟棄。

　　8．胚胎移植（胚胎的第3—6天） 理論上，胚胎在受精后的第l～6天的任何時期都可以移植。但是，為了選擇質量更好的胚胎，大多數試管嬰兒中心選擇第3－6天胚胎來移植。此時依據患者的年齡，曾經懷孕與否及胚胎的質量，決定移植胚胎的數目。

　　胚胎移植是一個非常簡單的程序，也是一個非常關鍵的程序，—般不需麻醉。手術時婦女處于仰臥姿勢。醫生用一個陰道擴張器暴露并清洗子宮頸，去掉子宮頸黏液后，檢查子宮頸口的通暢狀況。然后，實驗室技術人員將挑選好的胚胎吸進一條移植導管，遞給醫生，醫生將移植導管通過子宮頸送入子宮，把含有胚胎的液體注射到子宮腔內。在這個過程中可以移植一個或多個胚胎。整個移植操作僅需幾分鐘。

　　移植后息者休息約l個小時即可回家。在移植后的2－4 天內盡量休息，因為這是胚胎著床的重要時期。目前大多數醫生邊使用超聲儀觀察邊進行移植胚胎，這樣醫生可以準確地掌握胚胎的移植位置，懷孕率也會明顯的提高。

　　9．黃體的支持和妊娠檢查（胚胎移植后14天） 取卵后的第2～3天，或胚胎移植的前l天（第3天的胚胎移值）或前2－3天（囊胚移植）應該給患者使用孕酮來支持黃體。孕酮可以是口服的、陰道內給予的或是肌肉內注射的。孕酮的服用應持續到懷孕的診斷。如果沒有懷孕，即刻停止使用，如果懷孕了則繼續使用直到懷孕10周左右。有時黃體的支持還需要在胚胎移植后的幾天內給予1或2 次的絨毛促性腺激素，以補充體內過低的絨毛促性腺激素水平。

　　胚胎移植后第14天，胎兒體積仍然很小，無法在超聲波儀器下看清，很難判斷是否懷孕。但是由于胚胎著床后將分泌大量的絨毛促性腺激素，這些激素會進入血液，并會進入尿液，因此，可通過驗尿或驗血來確定絨毛促性腺激素的含量，從而判斷是否懷孕。懷孕檢查可能在14天后重復幾次以便確診。

　　10．胎兒檢查（胚胎移植后4~6周） 妊娠4—6周后，胎兒體積在超聲波儀器下清晰可見，因此可以通過超聲波儀器進一步來判斷懷孕情況，并且還可以觀察胎兒的數目。超聲波儀器下可見胎兒的發育、心臟的跳動和胎兒的活動情況。因此，懷孕后需要定時到產科醫生那里做檢查直到胎兒分娩。

　　生產試管嬰兒日程表 當夫婦決定用試管嬰兒的技術治療不孕時，從用藥的第一天到胚胎移植14天后的懷孕檢查，對于不孕夫婦來說是一個非常關鍵的時期。每天的生活和工作必須要配合醫生所安排的檢查、打針。不論你的工作有多么忙，既然已經決定了要接受試管嬰兒的方案，患者就應該以治療作為此段時間的重點。其實，如果安排好你的日程，既不耽誤你的工作，也能保證最好的配合治療。應當引以為戒的是，也許一個小的失誤，會使你的這一治療周期被取消。因此，細致的安排是相當重要的。